犬弓形蟲抗體檢測試劑盒
試劑及用品
1.預包被板條48/96T; 6.樣本稀釋液(5號液)1支;
2.酶結合物(1號液)1支; 7.終止液(6號液)1支;
3.洗滌液(2號液)1支; 8.陽性對照血清1支;
4.底物(3號液)1支; 9.陰性對照血清1支;
5.顯色液(4號液)1支; 10.使用說明書1份;
操作方法
1.樣本稀釋:用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清按1:100稀釋。陰、陽對照不用稀釋,直接加樣。
2.加樣反應:樣本檢測孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時設陰性、陽性及空白對照各1孔,取陰性、
陽性對照各100ul分別加入反應孔內,空白對照孔僅加入100ul樣本稀釋液(5號液)。37℃避光反應30分鐘后甩去孔內液體,每孔加洗滌液(2號液)1滴,立即用蒸餾水注滿,靜置30秒后甩去,再直接用蒸餾水洗滌四次,每次均需靜置30秒,*后一次甩去,拍干。
3.加酶反應:除空白對照孔外其余每孔加酶結合物(1號液)2滴,37℃避光反應30分鐘后甩去孔內液體,如上洗滌,拍干。
4.顯色反應:每孔加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴,混勻,37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴,混勻,終止反應(加終止液后藍色會變為黃色)。
結果判斷
1.肉眼觀察:陰性對照接近無色,陽性對照呈明顯黃色,表示實驗有效。待檢孔接近無色表示該標本為陰性,待檢孔呈明顯黃色表示該標本為陽性。
2.儀器判斷:以空白對照調零用酶標儀于450nm(620nm作參比波長)讀取O.D值。待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當陰性對照O.D值低于0.07時按0.07計算。
注意事項
1.試劑盒在2-8℃下保存,有效期六個月。,每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊,各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.洗滌時將蒸餾水加滿各孔,每次停放三十秒鐘,甩去孔內液體。禁用自來水等其它水源。
3.為提高實驗的可比性建議使用儀器判讀結果,并對陰性對照測復孔以減少誤差。